Esboniad manwl o anwadaliad ymweithredydd mewn arbrofion PCR

Esboniad manwl o anwadaliad ymweithredydd mewn arbrofion PCR.

Yn yr arbrawf PCR, ar ôl ychwanegu'r system adweithio, rydym yn gorchuddio'r caead yn ofalus ac yn cadarnhau dro ar ôl tro bod y caead ar gau er mwyn osgoi anwadaliad ymweithredydd. Ond weithiau mae gennym amheuon hefyd: rydym wedi cadarnhau bod y caead ar gau yn dynn, ond ar ôl i'r arbrawf gael ei gwblhau, bydd yr ymweithredydd yn dal i anweddu. Beth yw'r rheswm?

Mewn gwirionedd, anwadaliad ymweithredydd yw un o'r problemau mwyaf cyffredin mewn arbrofion PCR, ac mae yna lawer o ffactorau sy'n effeithio ar anwadaliad ymweithredydd.

Mae anweddiad yn cyfeirio at hynny yn ystod yr arbrawf PCR, mae'r toddiant adweithio yn anweddu ar dymheredd uchel, ac yna'n cyddwyso ar wal y botel neu'r gorchudd uchaf i ffurfio niwl dŵr neu ddefnynnau dŵr, neu'n gorlifo'n uniongyrchol o fwlch aer cap y botel neu'r ffilm, gan arwain mewn newid yng nghrynodiad yr hydoddiant adweithio. Gostyngodd newidiadau, faint o ddatrysiad adweithio, a rhai hyd yn oed yn anweddu i sychder, gan arwain at arbrofion annilys.

1. Pwysedd caead poeth, tymheredd

Mewn arbrofion PCR, rydym fel arfer yn cynhesu'r caead i atal anwedd ymweithredydd rhag anwedd. Mae tymheredd y caead wedi'i gynhesu fel arfer yn uwch na thymheredd yr ateb adweithio i atal anwedd anweddau.

Gellir rhannu caeadau gwresogi beiciwr thermol yn fras yn y pedwar math canlynol: caeadau gwresogi na ellir eu haddasu, caeadau gwresogi addasadwy, caeadau gwresogi addasol, a chaeadau gwresogi awtomatig. Mae caead wedi'i gynhesu y gellir ei addasu yn cynnwys cywasgiad tynn bysedd. Os na chaiff ei dynhau'n dynn, bydd adweithyddion yn anweddu. Gellir lleihau anweddiad ymyl trwy gynyddu'r pwysau ar y caead wedi'i gynhesu. Weithiau gall goddiweddyd pinsio'r tiwb a throelli'r bwlyn. O dan amgylchiadau arferol, gall y gorchudd gwresogi craff trydan ganfod traul gwahanol o wahanol uchderau yn awtomatig, cywasgu nwyddau traul yn awtomatig, ac mae'r pwysau'n unffurf ac yn gyson, a thrwy hynny leihau anweddiad ymweithredydd a gwallau â llaw, a gwella cywirdeb arbrofol ac ailadroddadwyedd.

2. Diffyg nwyddau traul

Ar gyfer gollyngiadau stêm, mae'r rhan fwyaf o bobl yn meddwl nad yw'r pwysau caead poeth yn ddigonol. Mae pwysau'r caead poeth yn bwysig iawn, ond dim ond un agwedd yw hynny. Mewn gwirionedd, mae nwyddau traul hefyd yn bwysig iawn.

Mae platiau orifice PCR fel arfer yn cael eu gwneud o ddeunyddiau plastig, sy'n ehangu ac yn anffurfio'n fawr ar ôl cael eu cynhesu. Mae cyfradd ehangu thermol y sylfaen fetel PCR a ddefnyddir i osod y plât orifice PCR yn isel iawn, ac ni all y plât orifice PCR ehangu fel arfer ar hyd yr awyren ar ôl ehangu thermol. Mae'r cyflwr chwyddedig yn gwneud y gorchudd gwres uchaf yn methu â chysylltu'n llawn ag wyneb y plât orifice PCR, gan arwain at dymheredd a gwasgedd anwastad, gan achosi anweddiad ymweithredydd ar ymyl y plât orifice PCR, ac effeithio ar yr effaith canfod PCR.

3. Nid yw nwyddau traul wedi'u selio'n dynn

Nid yw tyndra'r caead thermol a'r nwyddau traul yn golygu bod cap y tiwb PCR ar gau yn dynn, ac mae ansawdd plât ffynnon PCR yn anwastad. Mae nwyddau traul o ansawdd uchel, wyneb y ffroenell a'r gorchudd yn llyfn, ac mae'r sêl y tu ôl i orchudd y bocs yn dda, ac nid yw'n hawdd gollwng. Mae gan nwyddau traul israddol bigau anwastad a llinellau rheiddiol, a all achosi gollyngiadau yn hawdd neu hyd yn oed sychu.

Felly, mewn arbrofion PCR, ceisiwch ddewis nwyddau traul o ansawdd uchel ac addas. Ar yr un pryd, gellir ehangu'r system adweithio i leihau dylanwad anweddiad system ar yr adwaith.